檔案名稱：taq.htm

生工給您真正的PCR（Polymerase Cost Reduction）

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贈品表：
1.	dNTP (1mL, A, T, G, C each at 10mM，原價1,600元)
2.	100bp DNA Ladder Marker一支 (50ug，100次，原價1,000元)
3.	1Kb DNA Ladder Marker一支 (50ug，100次，原價1,000元)
4.	Agarose LE (50g，原價1,470元)
5.	L.B. Broth (500g，原價1,470元)

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產品資料

產品代碼：

101-9012-90-2

簡介：

Taq耐熱性核酸聚合脢主要用於對準確度要求不高的PCR擴增實驗，也是許多PCR檢測試劑組的主要成分。Taq核酸聚合脢由5'向3'端合成DNA，具有很強的DNA聚合能力，擁有已知耐熱性核酸聚合脢中最高的DNA延伸速度。Taq核酸聚合脢無3'至5'端外切脢活性，因此在PCR擴增時沒有校正功能。

濃度：

5U/uL

錯誤率：

10^-5

10X反應液：

100mM KCl
80mM (NH₄)₂SO₄
100mM Tris-HCl(pH9.0)
0.5% NP-40
20mM MgSO₄^註
註：不含鎂離子反應液無此成分

鎂離子溶液：

25mM MgCl₂

品質管制：

1.	無外來核酸脢活性。
2.	SDS-PAGE純度大於95%。
3.	以PCR方法檢測無外來DNA。
4.	能自50ng的Lambda模板中特異性擴增出1Kb及2.2Kb之單套（Single Copy）基因。

保存條件：

-20℃

參考資料：

Taq核酸聚合脢來源為高溫嗜熱菌Thermus aquaticus，分子量為94KD。PCR產物3'端帶有A鹼基突出。Taq核酸聚合脢無3'端向5'端之外切脢活性(故無錯誤校正功能)。聚合時延伸速度為每分鐘大於1200鹼基，最佳溫度為65-75℃，dNTP工作濃度為100-300uM，最佳Mg²⁺濃度為1.5-3.0mM，最佳pH為8.1-9.2。

使用方法：

50uL標準PCR擴增反應體系中約需Taq核酸聚合脢2.5U左右，模板10ng-500ng，其他參數設定請參考上列參考資料。

注意事項：

除了聚合脢活性喪失之外，下列因素也可能導致PCR擴增實驗失敗，請留意。

1.	模板DNA太多或太少。
2.	反應體系中含有鎂離子螯合劑或dNTP過量，導致鎂離子實際濃度過低。
3.	PCR儀溫度不準確。
4.	樣品中含有未知的Taq核酸聚合脢抑制劑。
5.	引子或dNTP部分降解。
6.	Taq核酸聚合脢用量過多。

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中華民國97年10月03日更新