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回分生實驗 | 回合成服務

RNA及siRNA合成

下載生工有限公司RNA訂購表

常見問題

RNA合成報告說明事項

‧siRNA and Control
‧普通siRNA Oligo Duplex
‧化學修飾siRNA Oligo Duplex
‧siRNA陰性對照
‧常用的siRNA陽性對照
‧螢光標記siRNA Oligo Duplex
‧RNAi超值套餐
‧轉染（ Transfection）試劑
‧單股RNA Oligo
‧miRNA (MicroRNA)合成
‧已驗證發表（Published and validated）的siRNA
‧新手套件（Starter Kit）Coming Soon!
‧RNAi干擾載體Coming Soon!

siRNA and Control

化學合成siRNA有操作簡便、轉染效率高、對細胞的或者組織的毒性小、可大規模制備等優點。特別適用在目標基因位置不確定情況下對有效siRNA片段進行篩選。

MDBio siRNA產品特性

品質管制 於嚴格控制的流程和條件下合成，符合ISO9000品質標準，產品經過紫外光度計精確定量。
純化方式 以HPLC純化，全長雙鏈siRNA含量＞97%。
標記與修飾 在3'和5'端標記生物素（Biotin）、螢光與磷酸根，以便於監測siRNA對特定基因表達的抑制效果。
長度 19至23鹼基/鏈
產品形式 單鏈RNA凍乾粉末；已黏合的雙鏈RNA凍乾粉末。
儲存與穩定性 保存於-20℃，並避免反覆凍融。在此條件下，RNA的穩定性可達6個月。螢光標記的RNA必須避光保存。
隨貨資料 包括名稱、序列、濃度、交貨OD值、精確莫爾數與純化方式。
序列設計 提供免費設計服務
包裝與運送 以1.5mL微量離心管包裝，採室溫運送，收到後請置於-20℃。

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普通siRNA Oligo Duplex

生工公司普通siRNA Oligo均經HPLC純化，100%去除尚未配對的單鏈RNA Oligo。您只需以隨附的通用緩衝液回溶，即可使用本公司的RNAi轉染試劑進行後續實驗。

產品
代碼		 產品說明 規格 純化
方式		 價格 交貨
期限
580005 Custom siRNA Oligo Duplex
 5OD HPLC 4,830元 約二週
580010 10OD 8,820元
580025 25OD 19,950元
580050 50OD 38,430元
580100 100OD 64,050元
580250 250OD 119,700元

* 一般情況下，對於一個21 bp的siRNA oligo，有如下簡單關係：
1OD duplex = 3.0nmol = 40ug

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化學修飾siRNA Oligo Duplex（Stable siRNA Oligo Duplex）

2'-F-rU 2'-F-rC

RNAi技術的最大難題就是化學合成siRNA的穩定性問題，生工公司化學修飾siRNA係將U與C鹼基二號碳上之氫氧基（-OH）以氟原子（F）取代 ，結構如上。

生工公司化學修飾siRNA解決您RNAi的難題。給您：
‧高效率的基因抑制
‧更長的作用時間
‧高穩定性
‧低副作用

現存問題 普通siRNA 生工公司化學修飾siRNA
siRNA Degradation 普通的非修飾siRNA在細胞培養過程中很容易降解，雖然在大部分的體外實驗中有效，但是在細胞培養中壽命較短。 化學修飾siRNA不僅延長了在血清和細胞培養中的壽命，並且加強了在體外實驗中的應用能力
Long Lasting Effect 作用時間較短，一般情況下為一周左右。 化學修飾siRNA作用時間長，比普通siRNA的作用時間延長一倍左右。
In vivo Activity 普通siRNA穩定性較差，一般不適用於體內實驗。 化學修飾siRNA在體內的穩定性佳。

產品
代碼		 產品說明 規格 純化
方式		 價格 交貨
期限
581005 Chemically Modified siRNA Oligo Duplex
5OD HPLC 6,930元 約二週
581010 10OD 10,500元
581025 25OD 21,630元
581050 50OD 39,900元
581100 100OD 68,250元
581250 250OD 128,100元

* 一般情況下，對於一個21 bp的siRNA oligo，有如下簡單關係：1 OD duplex＝3.0 nmols＝40 ug。

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siRNA陰性對照

想要正確分析RNAi實驗數據必須有合適的對照實驗。與哺乳動物基因無同源性並帶有螢光標記的陰性對照siRNA有利於轉染條件的優化，並可以作為非特異性基因抑制作用的對照。

一個完整的siRNA實驗應該有陰性對照。在siRNA初篩階段，您可以選擇生工公司備有現貨的siRNA陰性對照，但請務必確認此陰性對照與您要研究的目標基因間無序列同源性。當進一步做基因功能的研究時，siRNA陰性對照應與實驗組的siRNA有相同鹼基的組成，但是與mRNA沒有明顯的序列同源性。通常的做法是將實驗組的siRNA序列打亂，並確認結果與實驗用細胞中的其它基因沒有同源性。

．普通陰性對照（29551）： 與哺乳動物基因無同源性，適於作為一般實驗的陰性對照。

．螢光標記(FAM)陰性對照（29552）： 與哺乳動物基因無同源性，除作為實驗的陰性對照外，利用螢光標記，可以方便地在螢光顯微鏡下觀察轉染的效率，有利於優化轉染條件。螢光容易拍攝，並有很好的pH耐受性，在活細胞中也更加穩定。

產品
代碼		 產品
說明		 規格 純化
方式		 價格 交貨
期限
29551 Negative Control siRNA Oligo Duplex
5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'		 1OD HPLC 945元 現貨
29552 FAM Labeled
Negative Control siRNA Oligo Duplex
5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'		 2x0.5OD 1,680元

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常用的siRNA陽性對照

陽性對照是很重要的實驗系統檢查。當您看到siRNA陽性對照的預期實驗結果時，您才能確保在您的實驗體系中，轉染、RNA萃取與檢測方法都可靠無虞。生工為您準備了下列的看家基因（Housekeeping Gene）陽性對照供您選擇。

產品代碼 產品說明 交貨總量 價格
29554 LaminA/C 1OD 1680元
29555 GFP22
29556 Luciferase GL2
29557 MAPK1
29558 Beta-Actin
29559 Vimentin
29560 P53
29561 GAPDH
29562 Cyclophilin B

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螢光標記siRNA Oligo Duplex

siRNA兩股的4個末端可進行多種標記物標記。標記後的siRNA可以流式細胞儀、螢光顯微鏡、雷射共軛顯微鏡等觀察，以確定是否有效轉染及優化轉染條件。標記的siRNA還可用於siRNA細胞內定位及雙標記實驗（配合標記抗體）來追蹤轉染過程中成功轉染了siRNA的細胞，並觀察轉染效果與目標蛋白表達的抑制作用間之關連性。

反義股5'端標記會影響其基因抑制作用，所以不推薦在這一位點進行標記。在其他三個末端修飾對基因抑制作用幾乎沒有影響。生工為您在正義股的5'端修飾，目前這是公認最佳的化學標記位點。5'螢光標記的siRNA有助於直接觀察siRNA的轉染效率

產品
代碼		 產品說明 規格 純化
方式		 價格 交貨
期限
582001 FAM Labeled siRNA Oligo Duplex 5OD HPLC 7,245元 約三週
582002 10OD 12,810元
582003 25OD 25,620元
582004 50OD 46,410元
582005 100OD 72,450元
582006 250OD 142,800元
582011 TAMRA Labeled siRNA Oligo Duplex 5OD HPLC 7,245元 約三週
582012 10OD 12,810元
582013 25OD 25,620元
582014 50OD 46,410元
582015 100OD 72,450元
582016 250OD 142,800元
582101 FAM Labeled Chemically Modified siRNA Oligo Duplex 5OD HPLC 9,660元 約三週
582102 10OD 14,700元
582103 25OD 27,300元
582104 50OD 48,300元
582105 100OD 77,700元
582106 250OD 157,500元
582111 TAMRA Labeled Chemically Modified siRNA Oligo Duplex 5OD HPLC 9,660元 約三週
582112 10OD 14,700元
582113 25OD 27,300元
582114 50OD 48,300元
582115 100OD 77,700元
582116 250OD 157,500元

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RNAi超值套餐服務

您只需提供完整的基因序列，由我們幫您設計選擇合適的位點合成siRNA。如果未能篩選出有效的siRNA片段，我們將再次為您免費設計與合成。

一號超值套餐（產品代碼589000），只要31,500元，包括：
‧4對經HPLC純化之siRNA（每對10nmol），保證四對之中至少有一對可以有效抑制該基因的表達，抑制效率在70%以上。。
‧1對經HPLC純化之陰性對照siRNA（2.5nmol）（產品代碼29551）。
‧1對經HPLC純化之FAM標記Transfection陰性對照siRNA（2.5nmol）（產品代碼29552）。
‧1對經HPLC純化之陽性對照siRNA（2.5nmol）。
‧1管RNAi轉染（Transfection）試劑。（產品代碼21005）

二號超值套餐（產品代碼589001），只要23100元，包括：
‧3對經HPLC純化之siRNA（每對5nmol），保證三對之中至少有一對可以有效抑制該基因的表達，抑制效率在70%以上。。
‧1對經HPLC純化之陰性對照siRNA（2.5nmol）（產品代碼29551）。
‧1對經HPLC純化之FAM標記Transfection陰性對照siRNA（2.5nmol）（產品代碼29552）。
‧1對經HPLC純化之陽性對照siRNA（2.5nmol）。
‧1管RNAi轉染（Transfection）試劑。（產品代碼21005）

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轉染（ Transfection）試劑

RNA干擾技術已經成為研究基因功能的有力工具。任何一個RNA實驗的成功都有賴於：
1.高品質的siRNA（或shRNA表達載體）
2.有效的轉染方法

目前哺乳動物轉染的常見方法有：磷酸鈣共沉澱、電穿孔法、DEAE-葡萄聚糖和polybrene、機械法（例如：顯微注射和基因槍）、陽離子脂質體試劑，其中陽離子脂質體試劑轉染法是目前最常用的轉染方法。

陽離子脂質體轉染試劑的選擇對於運用siRNA的基因沉默實驗來說同樣至關重要。沒有高效的轉染，就不能有效的引發相應的細胞反應，會直接影響同一siRNA的抑制效果。只有高效地將siRNA轉染進哺乳動物細胞，才能更真實的檢測siRNA干擾基因表達的效果。

如何選擇最適合的轉染試劑和轉染條件，往往取決於不同的哺乳動物細胞類型和不同的核酸分子。RNAi-Mate適用於核酸的體內和體外操作，可應用於DNA、RNA、反義寡核甘酸、siRNA的轉染，也可應用於DNA/siRNA的共轉染操作。

應用領域：
‧原代培養細胞和轉化細胞株的基因轉染。
‧siRNA高通量轉染。
‧DNA轉染；DNA和siRNA的共轉染。
‧核酸（siRNA、DNA、RNA）的體內轉染。
‧貼壁細胞和懸浮細胞轉染。

特點：
‧不必更換培養基，操作簡便易行，再現性好，可在半小時內完成操作。
‧轉染效率高
‧在含血清培養基中也能表現高轉染效率。
‧可在室溫下運輸，在4℃下可長期保存。
‧細胞毒性低。
‧適用細胞廣泛。
‧即用型試劑，可在含有抗生素的完全培養基中轉染，操作簡單方便。
‧脂質轉染試劑，專門用於轉染，沒有RNAse活性。

產品
代碼		 產品說明 規格 價格 交貨
期限
21005 RNAi Transfection Reagent 0.1mL
(10 Rxns/35mm, 1mg/mL)		 1,260元 4-7天

使用手冊下載

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單股RNA Oligo

產品
代碼		 產品
說明		 規格 價格 修飾
價格		 交貨
期限
585002 Single Strand RNA Oligo 5nmol (2OD) 210元/鹼基 另詢 二週
585008 20nmol(8OD) 525元/鹼基

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miRNA（MicroRNA）合成

MicroRNA (miRNA) 是近幾年在真核生物中發現的一類具有調控功能的非編碼RNA，為19至24鹼基的小片段單股RNA，它們主要參與基因轉錄後的調控。in-4 、let-7 是最早發現的約22鹼基的RNA，為線蟲（Caenorhabditis elegans）中控制發育時序的基因，不編碼蛋白質。隨後在線蟲、果蠅（Drosophila melanogaster）、人的細胞中選殖出了類似的微小RNA 。這些19至25鹼基的RNA，包括lin-4 、let-7 被稱為microRNA。miRNA 的調控功能十分重要，近來發現它們在果蠅的細胞增殖、死亡及脂肪代謝，線蟲極性的形成，哺乳動物造血幹細胞的分化等過程中均有重要的調控作用。在植物中，miRNA 還參與了葉子與花的發育過程。動物（尤其是人） miRNA 的生物合成過程已有初步輪廓。首先，miRNA 基因的初級轉錄產物（pri-miRNA） 在細胞核中被RNaseⅢ Drosha 切割成為前體miRNA（pre-miRNA），在初次剪切後，pre-miRNA在轉運蛋白exportin-5的作用下由細胞核內被送到細胞質中，然後由另一種RNaseⅢ Dicer進一步切割產生成熟的miRNA。這些成熟的miRNA與其他蛋白質一起組成RISC（RNA-Induced Silencing Complex）複合體，從而引起目標mRNA的降解或者轉譯抑制。

您可以自行設計miRNA（產品代碼584008），也可以根據需要，選用Sanger miRNA資料庫中的序列。

產品
代碼		 產品
說明		 規格 價格 修飾
價格		 交貨
期限
583002 miRNA Molecule 5nmol (2OD) 252元/鹼基 另詢 二週
583008 20nmol
(4x5nmol, 8OD)		 525元/鹼基
584008 Customer-Defined
miRNA		 20nmol
(8OD)		 525元/鹼基

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已驗證發表（Published and validated）的siRNA

下列siRNA均已有文獻證實可以有效的抑制相應基因的表達，如需相關資料，歡迎您聯繫本公司索取。

產品
代碼		 基因 規格 價格
29601Beta-actin 5OD3990元
29602Gamma-actin
29603AIB1 (estrogen receptor coactivator)
29604Apaf-1
29605ARC21
29606ATR interacting protein
29607Bcr-abl
29608beta-tubulin- mouse neuronal
29609Bruton's tyrosine kinase (Btk)
29610Casein Kinase I epsilon and delta (CKI-epsilon and CKI-delta)
29611Caspase 1
29612Caspase 2
29613hCdc2
29614Cdc14A
29615cdk1
29616CENP-E
29617CHO1
29618corin, mouse
29619Cyclin B1
29620Cyclin B2
29621cytoplasmic dynein 1 heavy chain
29622DIP13-alpha (DCC interacting protein)
29623Dishevelled (hDv-1 and hDv-3)
29624hDv-2
29625Eg5
29626emerin
29627eve
29628hFbw7 (cyclin E ubiquitination)
29629Fortilin
29630GalTII (galactosyltransferase II)
29631GalTII (galactosyltransferase II)
29632GAS41 (1)
29633Hec-1
29634HPV E6
29635HPV E7
29636Tissue Factor (hTF)
29637vimentin
29638HtrA2
29639keratin 18
29640Kinase interacting stathmin (hKIS)
29641lamin A
29642lamin A/C
29643lamin B1
29644lamin B2
29645LAP2
29646Mad1
29647Mammalian septin (MSF)
29648Methyl-CpG-binding protein 2 (MeCP2)
29649Methyl-DpG binding domain protein 2 (MBD2)
29650MPS1 kinase (hMps1)
29651Nicastrin (Nct)
29652NuMA
29653Nup153
29654P160 ROCK
29655Polo-like Kinase1 (hPlk1)
29656Protein Kinase Receptor (PKR)
29657hRad9
29658Rad17
29659Myeloid cell leukemia protein 1 (MCL1)

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中華民國97年09月25日更新