檔案名稱:RNA.htm

回分生實驗 | 回合成服務

RNA及siRNA合成


超值套餐,限時特價

下載生工有限公司RNA訂購表

常見問題

RNA合成報告說明事項


siRNA and Control
普通siRNA Oligo Duplex
化學修飾siRNA Oligo Duplex
siRNA陰性對照
常用的siRNA陽性對照
螢光標記siRNA Oligo Duplex
RNAi超值套餐
轉染( Transfection)試劑
單股RNA Oligo
miRNA (MicroRNA)合成
已驗證發表(Published and validated)的siRNA
‧新手套件(Starter Kit)Coming Soon!
‧RNAi干擾載體Coming Soon!

siRNA and Control

化學合成siRNA有操作簡便、轉染效率高、對細胞的或者組織的毒性小、可大規模制備等優點。特別適用在目標基因位置不確定情況下對有效siRNA片段進行篩選。

MDBio siRNA產品特性

品質管制 於嚴格控制的流程和條件下合成,符合ISO9000品質標準,產品經過紫外光度計精確定量。
純化方式 以HPLC純化,全長雙鏈siRNA含量>97%。
標記與修飾 在3'和5'端標記生物素(Biotin)、螢光與磷酸根,以便於監測siRNA對特定基因表達的抑制效果。
長度 19至23鹼基/鏈
產品形式 單鏈RNA凍乾粉末;已黏合的雙鏈RNA凍乾粉末。
儲存與穩定性 保存於-20℃,並避免反覆凍融。在此條件下,RNA的穩定性可達6個月。螢光標記的RNA必須避光保存。
隨貨資料 包括名稱、序列、濃度、交貨OD值、精確莫爾數與純化方式。
序列設計 提供免費設計服務
包裝與運送 以1.5mL微量離心管包裝,採室溫運送,收到後請置於-20℃。

回頁首↑


普通siRNA Oligo Duplex $$價格查詢$$

生工公司普通siRNA Oligo均經HPLC純化,100%去除尚未配對的單鏈RNA Oligo。您只需以隨附的通用緩衝液回溶,即可使用本公司的RNAi轉染試劑進行後續實驗。

生工小幫手:

1OD260的雙股RNA Oligo Duplex約為40ug。
21鹼基對的雙股siRNA Oligo Duplex平均分子量約為13300。

您可以下列速算公式估算雙股siRNA Oligo Duplex之莫爾數:
1OD260 ≒ 40 ug ≒ 3.0 nmole

回頁首↑


化學修飾siRNA Oligo Duplex(Stable siRNA Oligo Duplex) $$價格查詢$$

2'-F-rU 2'-F-rC

RNAi技術的最大難題就是化學合成siRNA的穩定性問題,生工公司化學修飾siRNA係將U與C鹼基二號碳上之氫氧基(-OH)以氟原子(F)取代 ,結構如上。

生工公司化學修飾siRNA解決您RNAi的難題。給您:
‧高效率的基因抑制
‧更長的作用時間
‧高穩定性
‧低副作用

現存問題 普通siRNA 生工公司化學修飾siRNA
siRNA Degradation 普通的非修飾siRNA在細胞培養過程中很容易降解,雖然在大部分的體外實驗中有效,但是在細胞培養中壽命較短。 化學修飾siRNA不僅延長了在血清和細胞培養中的壽命,並且加強了在體外實驗中的應用能力
Long Lasting Effect 作用時間較短,一般情況下為一周左右。 化學修飾siRNA作用時間長,比普通siRNA的作用時間延長一倍左右。
In vivo Activity 普通siRNA穩定性較差,一般不適用於體內實驗。 化學修飾siRNA在體內的穩定性佳。


生工小幫手:

1OD260的雙股RNA Oligo Duplex約為40ug。
21鹼基對的雙股siRNA Oligo Duplex平均分子量約為13300。

您可以下列速算公式估算雙股siRNA Oligo Duplex之莫爾數:
1OD260 ≒ 40 ug ≒ 3.0 nmole

回頁首↑


siRNA陰性對照

想要正確分析RNAi實驗數據必須有合適的對照實驗。與哺乳動物基因無同源性並帶有螢光標記的陰性對照siRNA有利於轉染條件的優化,並可以作為非特異性基因抑制作用的對照。

一個完整的siRNA實驗應該有陰性對照。在siRNA初篩階段,您可以選擇生工公司備有現貨的siRNA陰性對照,但請務必確認此陰性對照與您要研究的目標基因間無序列同源性。當進一步做基因功能的研究時,siRNA陰性對照應與實驗組的siRNA有相同鹼基的組成,但是與mRNA沒有明顯的序列同源性。通常的做法是將實驗組的siRNA序列打亂,並確認結果與實驗用細胞中的其它基因沒有同源性。

.普通陰性對照(5860029551): 與哺乳動物基因無同源性,適於作為一般實驗的陰性對照。

.螢光標記(FAM)陰性對照(5860029552): 與哺乳動物基因無同源性,除作為實驗的陰性對照外,利用螢光標記,可以方便地在螢光顯微鏡下觀察轉染的效率,有利於優化轉染條件。螢光容易拍攝,並有很好的pH耐受性,在活細胞中也更加穩定。

.化學修飾陰性對照(5860029553): 與哺乳動物基因無同源性,長效實驗的第一選擇。

產品
代碼
產品
說明
規格 純化
方式
價格 交貨
期限
5860029551 Negative Control siRNA Oligo Duplex
5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'
1OD HPLC 945元 現貨
5860029552 FAM Labeled
Negative Control siRNA Oligo Duplex
5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'
2x0.5OD 1,680元
5860029553 Chemically Modified Negative Control siRNA Oligo Duplex
5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'
1OD 1,470元

回頁首↑


常用的siRNA陽性對照

陽性對照是很重要的實驗系統檢查。當您看到siRNA陽性對照的預期實驗結果時,您才能確保在您的實驗體系中,轉染、RNA萃取與檢測方法都可靠無虞。生工為您準備了下列的看家基因(Housekeeping Gene)陽性對照供您選擇。

產品代碼 產品說明 交貨總量 價格
5860029554 LaminA/C 1OD 1680元
5860029555 GFP22
5860029556 Luciferase GL2
5860029557 MAPK1
5860029558 Human Beta-Actin
5860029559 Vimentin
5860029560 P53
5860029561 GAPDH
5860029562 Cyclophilin B
5860029563 Mouse Beta-Actin

回頁首↑


螢光標記siRNA Oligo Duplex $$價格查詢$$

siRNA兩股的4個末端可進行多種標記物標記。標記後的siRNA可以流式細胞儀、螢光顯微鏡、雷射共軛顯微鏡等觀察,以確定是否有效轉染及優化轉染條件。標記的siRNA還可用於siRNA細胞內定位及雙標記實驗(配合標記抗體)來追蹤轉染過程中成功轉染了siRNA的細胞,並觀察轉染效果與目標蛋白表達的抑制作用間之關連性。

反義股5'端標記會影響其基因抑制作用,所以不推薦在這一位點進行標記。在其他三個末端修飾對基因抑制作用幾乎沒有影響。生工為您在正義股的5'端修飾,目前這是公認最佳的化學標記位點。5'螢光標記的siRNA有助於直接觀察siRNA的轉染效率


回頁首↑


轉染( Transfection)試劑

RNA干擾技術已經成為研究基因功能的有力工具。任何一個RNA實驗的成功都有賴於:
1.高品質的siRNA(或shRNA表達載體)
2.有效的轉染方法

目前哺乳動物轉染的常見方法有:磷酸鈣共沉澱、電穿孔法、DEAE-葡萄聚糖和polybrene、機械法(例如:顯微注射和基因槍)、陽離子脂質體試劑,其中陽離子脂質體試劑轉染法是目前最常用的轉染方法。

陽離子脂質體轉染試劑的選擇對於運用siRNA的基因沉默實驗來說同樣至關重要。沒有高效的轉染,就不能有效的引發相應的細胞反應,會直接影響同一siRNA的抑制效果。只有高效地將siRNA轉染進哺乳動物細胞,才能更真實的檢測siRNA干擾基因表達的效果。

如何選擇最適合的轉染試劑和轉染條件,往往取決於不同的哺乳動物細胞類型和不同的核酸分子。RNAi-Mate適用於核酸的體內和體外操作,可應用於DNA、RNA、反義寡核甘酸、siRNA的轉染,也可應用於DNA/siRNA的共轉染操作。

應用領域:
‧原代培養細胞和轉化細胞株的基因轉染。
‧siRNA高通量轉染。
‧DNA轉染;DNA和siRNA的共轉染。
‧核酸(siRNA、DNA、RNA)的體內轉染。
‧貼壁細胞和懸浮細胞轉染。

特點:
‧不必更換培養基,操作簡便易行,再現性好,可在半小時內完成操作。
‧轉染效率高
‧在含血清培養基中也能表現高轉染效率。
‧可在室溫下運輸,在4℃下可長期保存。
‧細胞毒性低。
‧適用細胞廣泛。
‧即用型試劑,可在含有抗生素的完全培養基中轉染,操作簡單方便。
‧脂質轉染試劑,專門用於轉染,沒有RNAse活性。

產品
代碼
產品說明 規格 價格 交貨
期限
5860021005 RNAi Transfection Reagent 0.1mL
(100ug, 1mg/mL)
1,260元 4-7天

建議用量:

Cell Culture Plate Format siRNA Culture Medium RNAi-Mate
96 well plate 0.3ug 100uL 0.9ug
24 well plate 1ug 500uL 3ug
12 well plate 2ug 1mL 6ug
6 well plate 5ug 2mL 15ug
35mm 5ug 2mL 15ug
60mm 10ug 5mL 30ug

使用手冊下載

回頁首↑


單股RNA Oligo $$價格查詢$$

生工小幫手:

1OD260的單股RNA Oligo約為33ug。
每一鹼基平均分子量約為330。

您可以以下速算公式估算單股RNA Oligo之莫爾數:
1OD260 ≒ (100/N) nmole
其中,N為RNA Oligo之長度

例如:1OD260之20鹼基RNA Oligo約為5 nmole

回頁首↑


miRNA(MicroRNA)合成 $$價格查詢$$

MicroRNA (miRNA) 是近幾年在真核生物中發現的一類具有調控功能的非編碼RNA,為19至24鹼基的小片段單股RNA,它們主要參與基因轉錄後的調控。lin-4 、let-7 是最早發現的約22鹼基的RNA,為線蟲(Caenorhabditis elegans)中控制發育時序的基因,不編碼蛋白質。隨後在線蟲、果蠅(Drosophila melanogaster)、人的細胞中選殖出了類似的微小RNA 。這些19至25鹼基的RNA,包括lin-4 、let-7 被稱為microRNA。miRNA 的調控功能十分重要,近來發現它們在果蠅的細胞增殖、死亡及脂肪代謝,線蟲極性的形成,哺乳動物造血幹細胞的分化等過程中均有重要的調控作用。在植物中,miRNA 還參與了葉子與花的發育過程。動物(尤其是人) miRNA 的生物合成過程已有初步輪廓。首先,miRNA 基因的初級轉錄產物(pri-miRNA) 在細胞核中被RNaseⅢ Drosha 切割成為前體miRNA(pre-miRNA),在初次剪切後,pre-miRNA在轉運蛋白exportin-5的作用下由細胞核內被送到細胞質中,然後由另一種RNaseⅢ Dicer進一步切割產生成熟的miRNA。這些成熟的miRNA與其他蛋白質一起組成RISC(RNA-Induced Silencing Complex)複合體,從而引起目標mRNA的降解或者轉譯抑制。

如蒙訂購,敬請您先至Sanger miRNA資料庫查詢確認您需要的miRNA後,再將該miRNA的序列提供給我們安排合成。


回頁首↑


已驗證發表(Published and validated)的siRNA

下列siRNA均已有文獻證實可以有效的抑制相應基因的表達,如需相關資料,歡迎您聯繫本公司索取。

產品
代碼
基因 規格 價格
5860029601 Beta-actin 5OD 5250元
5860029602 Gamma-actin
5860029603 AIB1 (estrogen receptor coactivator)
5860029604 Apaf-1
5860029605 ARC21
5860029606 ATR interacting protein
5860029607 Bcr-abl
5860029608 beta-tubulin- mouse neuronal
5860029609 Bruton's tyrosine kinase (Btk)
5860029610 Casein Kinase I epsilon and delta (CKI-epsilon and CKI-delta)
5860029611 Caspase 1
5860029612 Caspase 2
5860029613 hCdc2
5860029614 Cdc14A
5860029615 cdk1
5860029616 CENP-E
5860029617 CHO1
5860029618 corin, mouse
5860029619 Cyclin B1
5860029620 Cyclin B2
5860029621 cytoplasmic dynein 1 heavy chain
5860029622 DIP13-alpha (DCC interacting protein)
5860029623 Dishevelled (hDv-1 and hDv-3)
5860029624 hDv-2
5860029625 Eg5
5860029626 emerin
5860029627 eve
5860029628 hFbw7 (cyclin E ubiquitination)
5860029629 Fortilin
5860029630 GalTII (galactosyltransferase II)
5860029631 GalTII (galactosyltransferase II)
5860029632 GAS41 (1)
5860029633 Hec-1
5860029634 HPV E6
5860029635 HPV E7
5860029636 Tissue Factor (hTF)
5860029637 vimentin
5860029638 HtrA2
5860029639 keratin 18
5860029640 Kinase interacting stathmin (hKIS)
5860029641 lamin A
5860029642 lamin A/C
5860029643 lamin B1
5860029644 lamin B2
5860029645 LAP2
5860029646 Mad1
5860029647 Mammalian septin (MSF)
5860029648 Methyl-CpG-binding protein 2 (MeCP2)
5860029649 Methyl-DpG binding domain protein 2 (MBD2)
5860029650 MPS1 kinase (hMps1)
5860029651 Nicastrin (Nct)
5860029652 NuMA
5860029653 Nup153
5860029654 P160 ROCK
5860029655 Polo-like Kinase1 (hPlk1)
5860029656 Protein Kinase Receptor (PKR)
5860029657 hRad9
5860029658 Rad17
5860029659 Myeloid cell leukemia protein 1 (MCL1)

採購找生工,預算最輕鬆。

回頁首↑ | 回首頁←


中華民國101年02月17日更新